NBS5919 Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素

欄目：NoninBio

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Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素
貨號：NBS5919-1mg；
NBS5919-10mg
品牌：NoninBio

Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素

產品編號	產品名稱	包裝規(guī)格	價格
NBS5919-1mg	Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素	2x500ug	2248
NBS5919-10mg	Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素	20x500ug	18623

【溫馨提示】：見我司提供的活體成像底物-腔腸素及衍生物產品專題。

產品簡介：

腔腸素（Coelenterazine）是在水生生物中發(fā)現(xiàn)的一種發(fā)光基團（luminophore），是許多熒光素酶的作用底物，包括海腎熒光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜錨定熒光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和藪枝蟲熒光素酶（Obelia luciferase），和發(fā)光蛋白包括水母發(fā)光蛋白（Aequorin）的構成之一。其作用原理是以腔腸素為底物的熒光素酶，在含分子氧的條件下，氧化腔腸素產生高能量的中間產物，在此過程中發(fā)射藍色光，光波長在450~480nm。而甲蟲（或螢火蟲）熒光素/熒光素酶（FLuc）系統(tǒng)不同，其在含分子氧的條件下，還需要ATP和Mg²⁺的存在才能同時發(fā)光，光波長在550-570nm。正由于生物發(fā)光信號和底物的差異，RLuc常常與FLuc聯(lián)合用于多重轉錄報告基因研究，或用作Fluc系統(tǒng)內螢火蟲熒光素酶轉染的內參。

腔腸素應用甚是廣泛，包括：1）活細胞或組織的鈣離子檢測；2）細胞或組織的超氧化物和過氧亞硝基陰離子（活性氧，ROS）化學發(fā)光檢測；3）基因報告基因檢測；4）動物活體檢測；5）ELISA和生物發(fā)光共振能量轉移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）藥物高通量篩選（HTS）。

天然腔腸素（Coelenterazine Native）是自然界中存在最豐富的一種腔腸素，也是目前應用最普遍的一種標準底物。不僅是天然水母發(fā)光蛋白復合物的發(fā)光基團，也是海腎熒光素酶（Rluc）和分泌型膜錨定熒光素酶（Gluc）等的作用底物。還可用于生物共振能量轉移BRET，細胞或組織內的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子水平（ROS）的化學發(fā)光檢測。

本品為專供體內成像研究的注射用天然腔腸素（Injectable native Coelenterazine），不僅含有超純的天然腔腸素（＞99%），還提供特別設計的Inject-Diluent溶劑，能夠最大程度的溶解腔腸素，從而最小化體內注射體積。另外，與傳統(tǒng)乙醇溶解的腔腸素相比，用Inject-Diluent溶解的腔腸素能得到更好的熒光信號。

保存條件:

-20℃干燥避光保存，且保存于惰性氣體內。至少一年有效。

產品組成：

組分	名稱	規(guī)格
組分	名稱	NBS5919-1mg	NBS5919-10mg
NBS5919-A	Native Coelenterazine	2×500μg	20×500μg
NBS5919-B	Inject-Diluent	1×500μl	10×500μl

產品使用：

1．使用裝有23 gauge或更小針頭的0.5-1.0ml注射器，吸取150μl 溫熱（35-50℃）的Inject-Diluent。

2．將150μl Inject-Diluent打入Native Coelenterazine瓶內，使用針頭和注射器上下吸打或低速渦旋，直至看到完全透明溶液，此時得到腔腸素溶液濃度為3.33mg/ml。如果溶液沒有完全透明，用水浴鍋或加熱板在60-80℃加熱幾分鐘，檢查完全透明。

3．按下表1，用胰島素注射器吸取15-75μl充分溶解的腔腸素溶液（3.33mg/ml），通過尾靜脈注射到動物體內。檢查，排氣，沖洗針頭。使用胰島素注射器的優(yōu)勢在于很低的液體滯留體積（＜2μl）。緩慢注射。

建議按照表1單只小鼠（25g體重）的腔腸素溶液（3.33mg/ml）注射劑量表

需要的底物質量	腔腸素溶液注射體積
50μg	15μl
100μg	30μl
200μg	60μl
250μg	75μl

【注意：分泌型膜錨定熒光素酶（Gluc）比其他熒光素酶強許多倍，具有更高的Km值，因此需要更多的腔腸素底物來達到理想的信號值。天然腔腸素是唯一的底物能用于分泌型膜錨定熒光素酶。建議每只25g體重的小鼠，使用100-200μg腔腸素。往每只25g小鼠內注射的液體量不要超過70-80μl。若需要更高底物，可提高腔腸素溶液的濃度。】

附錄1 天然腔腸素及其衍生物的光譜特性：

產品名稱	產品編號	Em (nm)	RLC[1]	Relative Intensity[2]	Half-rise time (ms) [3]
Coelenterazine native	NBS5918	466	1.00	1	6-30
Coelenterazine h	NBS5920	466	0.75	16	6-30
Coelenterazine 400 a	NBS5922	400	/	/	/
Coelenterazine e	NBS5923	405&465	0.5	4	0.15-0.3
Coelenterazine f	NBS5924	472	0.80	20	6-30
Coelenterazine cp	NBS5925	442	0.63	28	2-5
Coelenterazine hcp	NBS5926	445	0.65	500	2-5
Coelenterazine n	NBS5928	468	0.25	0.15	6-30
[1] RLC = relative luminescence capacity: Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca²⁺relative to native aequorin = 1.0. [2] Ratio of the luminescence of aequorin reconstituted with coelenterazine analog relative to native aequorin at 100 nM Ca²⁺. [3] Half-Rise Time: The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1 mM Ca²⁺to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest.

附錄2天然腔腸素及其衍生物的應用差異：

產品編號	產品名稱	應用特征
NBS5918	Coelenterazine native	應用非常廣泛的標準底物。腔腸素是天然水母發(fā)光蛋白復合物的發(fā)光基團，也是海腎熒光素酶（Rluc）的底物。底物的快速再生（fast regeneration）比較重要的實驗推薦使用天然腔腸素。 1）生物發(fā)光檢測鈣離子的靈敏度非常高，檢測范圍從0.1μM到＞100μM；2）使用腔腸素監(jiān)測報告基因表達是其主要應用；3）其他應用包括生物共振能量轉移BRET，化學發(fā)光檢測細胞或組織內的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子水平（ROS）；
NBS5920	Coelenterazine h	1）腔腸素h形成的水母發(fā)光蛋白復合物比天然腔腸素復合物的光強度高10倍以上；2）比天然腔腸素對鈣離子敏感度更高；3）也適用報告基因分析。
NBS5922	Coelenterazine 400 a	也稱為DeepBlue C，是一種腔腸素衍生物，用作海腎熒光素酶Rluc的底物，發(fā)射峰約400nm。含GFP受體的BRET研究是Rluc的首選底物，因其對GFP受體的發(fā)射波干擾非常小。不可用作Gluc底物。
NBS5923	Coelenterazine e	體外水母發(fā)光蛋白再生中腔腸素e的速度最高，具有雙發(fā)射峰，分別為405nm和465nm，使其能在pCa 5-7范圍內通過雙發(fā)射峰熒光強度比率的方式測定Ca²⁺濃度，提高檢測準確度。但由于滲透性差，不適合胞內應用。在溶液中穩(wěn)定性差。
NBS5924	Coelenterazine f	腔腸素f形成的水母發(fā)光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的20倍，最大發(fā)射波長約長8nm。具有最好的細胞滲透性。當需要具極高鈣離子Ca²⁺靈敏度的水母發(fā)光蛋白復合物，建議用腔腸素f。
NBS5925	Coelenterazine cp	Coelenterazine cp產生水母發(fā)光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的15倍，且具有更快的Ca²⁺反應性。
NBS5926	Coelenterazine hcp	其生物發(fā)光強度最高（腔腸素hcp形成水母發(fā)光蛋白復合物的熒光強度比天然腔腸素復合物高190倍），對Ca²⁺反應速度快。
NBS5927	Coelenterazine fcp	腔腸素fcp形成的水母發(fā)光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的135倍。
NBS5928	Coelenterazine n	所有的腔腸素衍生物中熒光強度最弱，對Ca2+反應時間明顯慢于天然腔腸素。一種非常有用的低靈敏腔腸素。
NBS5929	Coelenterazine i	體外腔腸素i水母發(fā)光蛋白復合物的熒光強度僅為天然腔腸素復合物的3%，在所有腔腸素衍生物種對鈣離子的反應時間最慢。
NBS5930	Coelenterazine ip	體外腔腸素ip水母發(fā)光蛋白復合物的熒光強度幾乎比天然腔腸素復合物高50倍，但對鈣離子的反應時間比天然腔腸素慢。
NBS5932	Methyl Coelenterazine	非常優(yōu)越的抗氧化劑，靶向細胞內來源于單態(tài)氧和超氧化物陰離子產生的活性氧物質（ROS）。

注意事項：

1. 本品特別開發(fā)適用于體內實驗。若僅做體外實驗，可使用我司提供的天然腔腸素（Coelenterazine Native）（貨號：NBS5918）或腔腸素h（Coelenterazine h）（貨號：NBS5920）。

2. 商業(yè)化腔腸素的種類繁多，有天然腔腸素，以及各種腔腸素衍生物（比如，腔腸素h，腔腸素400a，腔腸素e，腔腸素f，腔腸素hcp）。它們對鈣離子的親和力，光譜特性，以及應用傾向上會有差異，詳見附錄1—天然腔腸素及其衍生物的光譜特性，附錄2—天然腔腸素及其衍生物的應用差異選擇適當?shù)漠a品。

3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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